Kromasil液相色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件,被測物質能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性的作用,因此,應特別注意色譜柱的活化環節,此外色譜柱的日常維護也很重要,有效地維護可以延長色譜柱的使用壽命。
Kromasil液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不鏽鋼製成,壓力不高於時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不鏽鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不鏽鋼柱內壁塗敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融矽或玻璃襯裏的,用於細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不鏽鋼或鈦合金,取決於填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內徑一般是根據柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應。
Kromasil液相色譜柱的選擇至少要認準這3點
1.填料基質
1.1.矽膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值範圍有限。大多矽膠基質填料在pH2-8之間穩定,但經過特殊修飾的矽膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。
1.2.聚合物基質:應用pH值範圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
2.含碳量
含碳量指的是矽膠表麵鍵合相的比例,與比表麵積和鍵合覆蓋度等有關。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間,用於要求高分離度的複雜樣品;低含碳量分析時間短、展現不同的選擇性,用於快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
3.孔徑和比表麵積是相輔相成的兩個概念。孔徑小比表麵積大,反之亦然。比表麵積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和複雜成分的分離度;比表麵積小,平衡時間快,適合梯度分析。